微生物检测流程

咱做微生物检测这一套流程啊,其实就三件事儿:先把样品给稀释成能数得清的程度,然后倒进培养基里去培养,最后拿尺子和眼睛数个数就成了。先说样品稀释这块儿。不管是固体、半固体还是液体样品,第一步都是要把“大海”变成“泳池”。拿固体或半固体来说吧,咱称取25克样品,把它丢进有225毫升缓冲液或生理盐水的无菌均质杯里,用8000到10000转每分钟的速度搅拌个1到2分钟;要是用的是均质袋,那就用拍打式均质器狠狠拍上一两分钟,直接就能得到1比10的均匀液体了。液体样品稍微简单点,拿个无菌吸管吸25毫升原液,倒进有225毫升稀释液(还得加几颗无菌玻璃珠)的锥形瓶里,使劲摇一摇,同样也能得到1比10的匀液。搞定了1比10的稀释度之后,咱们再换一根全新的1毫升无菌吸管,沿着管壁慢慢把匀液注进9毫升的稀释液里去,吹一吹或者晃一晃,这时候就变成1比100了。每往上递增10倍浓度的时候,吸管和吸头都得换掉一次,千万别混用,免得弄出交叉污染来。 根据大家对样品里有多少菌的估计呀,咱们挑出2到3个合适的稀释度(如果是液体样品的话有时候还能保留原液),准备往平板上涂布。每个稀释度做两个平皿吧,顺手再设两个空白对照做比较。 接下来是倾注培养基这一步。这时候得把培养基冷却到46度左右才行。把那个46度±1度的平板计数琼脂培养基大概15到20毫升迅速倒进去平皿里去。手拿着培养皿转一转让培养基均匀铺开来。这一步可太关键了,能不能把菌落铺得匀匀的就看它了。 最后是培养和计数。这个过程得有耐心啊。普通的样品一般是36度±1度养个48小时左右;要是水产品就得换成30度±1度养个72小时左右。如果觉得可能会有那种到处乱爬的细菌长成一片的情况呢?咱就在上面再盖一层薄薄的培养基大约4毫升左右再接着养。 等时间到了以后用肉眼看看配合放大镜或者菌落计数器把数记下来。有个规定是说:30到300个CFU之间的平板是有效的;如果少于30个CFU就把具体的数字记下来;要是超过300个就写个“多不可计”;每个稀释度把两个平皿的平均数算出来就行。 要是碰上大片的菌落或者是一条链一条链长出来的情况也别怕:大片的菌落要是只占半个盘子另一半还挺好就数完这半个然后乘以2;要是超过了一半这盘就算废了;要是菌落连成一条链子又分不清单个的界限每条链子就算一个CFU就行。 到了最后出结果报告的时候咱们得把数据给落地实锤了:要是所有的平板上的菌都蔓延着看不清楚直接报个“蔓延”;要是空白对照上面也长了菌那这次检测就白做了;要是称重量取样就按CFU每克算;如果是体积取样就按CFU每毫升算。 把这一套稀释、培养到计数的细节都落实到位了,咱们才能得到那些准确又可靠还能追根溯源的微生物检测结果。