30分的时间给你个建议:别忘了在正式测定前,随便挑3个差别最大的样本

30分的时间给你个建议:别忘了在正式测定前,随便挑3个差别最大的样本先试一下。酸性蛋白酶(Acid protease, ACP)这种酶啊,特别喜欢在酸溜溜的环境里把蛋白质给水解了。因为这个特性,它就被拿来用在酒精发酵、啤酒酿造这些地方,还有毛皮软化、果酒澄清、酱油酿造甚至饲料方面。这个实验用的是分光光度法,刚好50管能测24个样。 在做这个实验之前,你得先把酸性蛋白酶试剂盒里的各种东西检查一遍,看看有没有漏的,或者有没有变成浑浊的、沉淀的样子。拿到室温里放个10分钟左右再用。还有啊,把那些需要稀释的校准品拿出来,给它们加特定的液体调个梯度。试剂这一块也得现配现用,特别是那个试剂一。如果你加完水出现了白色絮状物,那这个就不能用了。 你需要准备的仪器有可见分光光度计、水浴锅这些,还有磁力搅拌器和移液枪。准备好1mL的玻璃比色皿和EP管就行了。试剂盒里液体一和液体二各一瓶,一般都是放在冰箱里。用的时候按76μL、17μL和18mL的比例混到蒸馏水里。试剂二和四都是粉剂,临用前加点水化开就行。至于试剂三有点麻烦,要先加20mL试剂一搅着,再放到沸水浴里加热个15到30分钟。因为这是过饱和的东西,稍微有点颗粒不影响用。 标准品是那种液体的1mL一支,浓度是0.25μmol/mL。做生化测定的步骤大概分成六步:先准备东西、配试剂、设参数、校准质控、测样本、算结果。 具体说来第一步准备就是把试剂、样本还有仪器都搞好。然后是试剂配制,有的直接用就行。有的需要混着用就按比例配好。校准品也得用配套的液稀释成几个浓度梯度。 仪器那边设置好方法、温度和时间就行。波长主要看680nm这个吸收峰。吸光度的变化就靠这个算活性了。 校准的时候拿高、中、低三个质控品去测一下看对不对得上标准曲线。拟合方式通常选Spline来画。 测样本的时候严格按照试剂和样本的比例加进去。反应好了以后机器自动读数据。 最后根据标准曲线把浓度算出来记下来就行。 注意哈:相关产品……