做小鼠脑立体定位注射 AAV，跟其他打针法比起来，这算是最精准的，打针的量也少，可是它也有侵入性强、对做手术的人技术要求高的毛病。给小鼠头皮上打麻药之前，得先把它从头到耳朵中间那块的毛剃光。把麻好的老鼠固定到脑立体定位仪上时，先给它眼睛抹点青霉素眼药膏护着，再把门齿卡在挂钩上稳住头。 一定要检查好左右耳杆在不在一个水平线上，要把它们塞到外耳道里。看到它鼻对着正中线、头一动不动、拎着尾巴也不掉、大脑看上去平平的，这就算固定好了。接着要给头皮消消毒，用碘伏或者无色的葡萄糖氯己定溶液擦洗干净。然后用手术刀把中间的头皮剪开，再用镊子把表面的结缔组织挑干净，好让颅骨露出来。 调平的时候，先找个叫前囟的地方把它当成坐标原点归零，左右调平让两边一样高，前后也得调平保持一致。接下来查图谱看要往哪个脑区打针。查到的坐标值有 ML、AP、DV 这几个数字，也就是 X、Y、Z 轴的坐标。把坐标调好后把针撤开，用颅骨钻在这地方开个窗（因为颅骨特别薄，钻的时候千万要小心别伤了脑子！）。 微量注射器吸满病毒液后固定在定位仪上，对准刚才设好的位置开始注射。速度控制在 0.1 到 0.15 微升每分钟，打多少毫升得看具体实验要求。打完针别急着拔，得在里面留 10 分钟让病毒液充分吸收完再慢慢往外退针。最后把头皮缝起来消毒一下就算结束了。 把老鼠从仪器上拿下来放回笼子里让它苏醒就行。醒过来后正常喂喂吃的就行。大概过了 2 到 4 周就能看到转基因的表达情况了。提醒一句：要是麻醉时间太长了就别用酒精消毒了，酒精挥发太猛容易让老鼠冻死。做手术和醒过来的时候都得给它保暖别着凉。