咱们来聊聊怎么给小鼠做脑立体定位注射AAV病毒。虽说脑定位能精准打击,用量也少,就是伤得也深,还特别看技术。 一开始得把动物称好体重,打好麻药。等完全麻倒了,用剃刀把头顶那块的毛剃光。接着把门齿挂上固定架,检查耳朵是不是在一条水平线上,插进去固定住。 判断是不是装好要看三点:鼻子要对着正中间,头一动不动,提尾巴不掉下。标准达到了就消毒剪皮,用镊子把表面的肉皮拨拉开。 找准前囟那个交叉点(看右下图B的十字),给它归零,左右前后调平。然后查图谱确定坐标,AP是Y轴,ML是X轴,DV是Z轴。根据设定的坐标值把针移开,用钻头在颅骨上钻个小孔。 这时候一定要注意力度!颅骨太薄了!打完孔把病毒吸进微量注射器里固定好。按坐标慢慢推注进去,速度别超过0.15微升每分钟,剂量看实验需要。 等注完10分钟让病毒吸透了再慢慢退针。缝好头皮消毒就算完事了。把动物拿下来等苏醒就能回笼。一般2到4周就能看转基因为啥的效果了。 最后提个醒:如果麻醉时间长最好别用酒精消毒,酒精挥发太容易让体温低了送命。手术和恢复的时候记得保暖。