CELL-WISE 293培养基CW001这个产品的使用说明要给大家讲讲。咱们先说一下它的货号是CW001。CELL-WISE 293培养基最大的特点就是它适合做瞬时转染，能让HEK293细胞高密度地悬浮起来。这里的培养基不仅没蛋白，还没有动物源成分，完全是化学成分限定的，你拿出来就能直接用。 现在咱们看看这个产品的参数规格。外观上是一种澄清透明的红色液体，渗透压控制在275±15 mOSM，pH值在6.9到7.4之间。检测结果显示它是无菌的，内毒素含量也低于5 EU/mL。把它存放在2到8摄氏度的避光地方就行，有效期能长达12个月。不过要记住哦，这玩意儿只能用在科学研究上，可不能拿来给人或动物治病诊断。 接下来我就把这个产品的使用方法详细说说。先说说细胞驯化这部分。第一种情况是直接驯化。大部分时候，你之前用别的培养基培养的细胞，直接用Balance CD 293 medium就能适应过来，只需要按照平时传代的习惯换液就行。第二种情况是渐进式驯化。得注意了，得挑那种低代数、正好在对数生长期的细胞来做。 具体步骤是这样的：先在原来的培养基里复苏细胞，再接着用原来的培养基传代个两三次到三次直到细胞状态稳定下来。等到细胞密度到了2x10 6个/mL的时候就可以换液了，换完之后让细胞密度保持在0.5到0.6x10 6个/mL。这时候给它配种一种混合液：传统的含有5%到10%血清的培养基或者别的无血清培养基和Balance CD 293 medium按75:25的比例混合。然后把这个培养瓶放在37摄氏度、5%二氧化碳、转速110到175转每分钟的摇床里养着。 大约过了3到4天，细胞密度要是达到了3x10 6个/mL而且活率还大于90%，那这次换液就换成分数为50:50的混合液。注意这时候的起始密度得控制在0.5x10 6个/mL。如果发现细胞长得有点慢，你就把上清液给离一下心留个20%的条件培养基，再往里面加80%的5到10%血清传统培养基或者别的无血清培养基跟Balance CD 293 medium按75:25混合的溶液接着养。 重复上面的步骤多来几次逐渐增加Balance CD 293 medium的比例（5到10%血清传统培养基或者别的无血清培养基跟Balance CD 293 medium的比例从25:75一直加到10:90），一直加到100%都是这个产品为止。在100%的产品里传代几次后发现传代后3到4天细胞密度能到2到3x10 6个/mL而且活率还大于90%，那就说明细胞彻底适应了这种培养基。接下来做传代培养的时候初始密度可以降到0.3x10 6个/mL，一般传代2到3次之后再做转染实验。要注意的是驯化的过程中前三代细胞状态可能不咋好，不过一般到第四代就会好很多了。