你得先搞清楚,cf488a-bsa和cf405m-bsa

你得先搞清楚,CF488A-BSA和CF405M-BSA其实是把牛血清白蛋白(BSA)跟CF系列荧光染料连在一块儿的产物。这两个家伙结合了BSA的生物相容性和载体功能,还有染料本身的发光特性。CF488A-BSA发绿光,激发波长在488到495纳米,发射波长是515到520纳米。它亮度高,光还挺稳定,特别适合长时间看动态的过程和做多色实验。而CF405M-BSA发蓝紫光,激发波长在405到408纳米,发射波长是425到452纳米。这玩意儿量子产率高,发射峰又窄,适合做深层组织成像和超分辨显微镜。 说到具体怎么连的,主要是利用NHS酯跟BSA的赖氨酸残基发生反应。这种连接方式很牢靠,能保住BSA原本的形状和活性。CF488A因为电荷低,不容易扰乱蛋白的等电点;CF405M水溶性好、抗漂白能力强,还能把光谱重叠的问题给解决了。BSA本来就能结合脂肪酸或者药物,连染料之后生物活性也没受影响。这就很适合研究细胞是怎么吞东西的,或者是给药物做载体。 选的时候得看你用什么设备。如果激光是488纳米就选CF488A,要是405纳米就挑CF405M。长时间观察或者追动态的就用CF488A(光稳),做多色分析或者超分辨就用CF405M(峰窄)。想看深一点的地方或者活体实验可以选CF405M(穿透强)或者CF488A(亮度高)。这两个还能配在一起用,再加上红或远红外的染料比如AF647,就能做多通道成像了。 保管的时候要注意别见光,冻干粉放-20℃就行。用的时候戴手套避免皮肤和眼睛接触。工作浓度别太高,微克每毫升级比较合适,不然容易出非特异性结合或者对细胞有毒。拍照的时候用抗淬灭封片剂(比如含DABCO的),控制好曝光时间和激光功率。活细胞实验得先看看标记物对细胞有没有影响。含荧光染料的废液按有毒物质处理就行了。 另外还有几个相关的试剂:DBCO-PEG5-GGG-AmineSulfo-Cy3-AzideAF750 Tyramide Conjugates、Alexa Fluor750 Tyramide、AF750 TSA Conjugates、SiR-PEG4-BCNSiR-PEG4-DBCO、SiR-PEG4-Me-tetrazine、SiR-PEG4-NHS ester、SiR-PEG4-COOH、SiR-PEG2-NH2、SiR-PEG2-C6-ClHMSiR-Carbamate-BGHMSiR-Amide-DBCO。