3月28日凌晨，伊朗革命卫队确认将伊朗科技大学列入合法打击名单，因为他们认为科研机构已经是军工体系的一部分。美以方面出动了F-16和MQ-9战机进行反击，而美国的MQ-9无人机在设拉子上空被击落，这是美国无人机在该地区被击落的清晰画面首次公开。F-16战机在法尔斯省南部被导弹击中，飞行员跳伞后落入沙特境内，沙特方面默许了此事。 当晚以色列也采取了行动，对德黑兰进行了三轮空袭。以色列声称摧毁了伊朗九成重要军工设施，涉及导弹研发和核相关设备，但未透露具体地点。 也门的胡塞武装也对以色列南部的军事基地发动了攻击，并声明与伊朗和真主党协作。伊朗科技大学虽然遭受袭击，但服务器并未全坏，部分数据可能已备份或转移。 美军派出了“的黎波里”号两栖舰前往中东，搭载三千五百名陆战队员。然而这个表面上是为了加强地区存在感的行动背后存在问题：弹药库存仅够四十五天高强度作战，补给线也过长。 沙特和阿联酋最近与伊朗重新联系，阿曼和卡塔尔也恢复了外交接触。这表明他们开始担心美军撤离后无法应对局势。 伊朗这次没有发动大规模报复行动，防空系统主要拦截高价值目标而不是随意轰炸。他们采取精准打击要害的方式显示出他们正在发展小而精的作战能力。 对于沙特默许F-16迫降一事说明海湾国家对美国和以色列的行动越来越担心并害怕被卷入冲突中。